絕大多數ELISA試劑盒實驗人員頭疼的問題，莫過于試驗成果不抱負。其實做科研試驗，就是這樣在不斷探究中尋求真理。很難有人可以的試驗成功。一旦出現“花板"，實驗結果必須放棄，重新進行，不僅浪費物料和時間，而且還會出現樣本量缺少、交叉污染、報告延遲等一系列問題。

影響因素分析如下：

一、標本因素

正確處理標本，防止大規(guī)模溶血、血漿層異物、使用一次性加樣槍頭，防止交叉污染。血清和血漿均可以用于檢測，但血清的分離應在抽血后等血液凝固后再離心。

二、試劑因素

正確保存及使用有效試劑。使用過期試劑及底物接觸金屬容器、底物混合后放置時間較長均影響實驗結果的準確性。選擇試劑時應選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好，批間差小的試劑。不同廠家的試劑不能混用，包括底物和洗滌液。檢測前應將試劑放置室溫平衡半小時，洗滌液應現用現配，同時觀察濃縮洗滌液中有無結晶，若有結晶應放37℃水浴中融化后才可使用。

三、技術人員操作因素

嚴格按照相關實驗SOP操作實驗。加樣時應盡可能的垂直加樣，并加在包被孔的底部（注：勿應用力過度破壞底部包被物質），不可加在孔的上部及外部。

四、洗板機的因素

ELISA試劑盒廢液瓶裝滿后應及時清空，以防止廢液回流對管道的污染，而使洗滌不，造成“花板"。洗板結束后應用蒸餾水清洗管道，以防止廢液在管道中的殘留。同時應根據儀器維護保養(yǎng)程序，定期對洗板機進行維護保養(yǎng)。

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